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【論述題】以某一序列已知的真核生物基因?yàn)槔?,如編碼動物激素的基因,使其在E.coli中表達(dá)簡要說明實(shí)驗(yàn)中可能遇到的問題及可能的解決辦法。
答案:
要使動物中編碼激素的基因在E.coli中表達(dá),通常遇到的問題有:
(1)E.coli的RNA聚合酶不能識別真核...
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問答題
【論述題】已知目的的cDNA序列,擬采用基因工程技術(shù)使其在哺乳細(xì)胞中表達(dá),請寫出設(shè)計(jì)方案。
答案:
提取目的基因的mRNA,逆轉(zhuǎn)錄生成cDNA,根據(jù)已知的cDNA序列設(shè)計(jì)引物,以cDNA為模板進(jìn)行PCR,瓊脂糖凝膠電泳,...
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問答題
【論述題】你在做Southern印跡分析,并且剛完成了凝膠電泳這一步。根據(jù)方案,下面一步驟是用NaOH溶液浸泡凝膠,使DNA變性為單鏈。為了節(jié)省時(shí)間,你略過了這一步,直接將DNA從凝膠轉(zhuǎn)至硝酸纖維素膜上。然后用標(biāo)記探針雜交,最后發(fā)現(xiàn)放射自影片是空白。錯(cuò)在哪里?試分析其原因。
答案:
錯(cuò)在了膜上的DNA沒有變形為單鏈,所以無法和探針結(jié)合,所以最后發(fā)現(xiàn)放射自影片是空白。當(dāng)然,也有可能是實(shí)驗(yàn)時(shí)膜上的DNA和...
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